مطلوبہ استعمال

ڈینگی NS1 Ag-IgG/IgM کومبو ٹیسٹ ڈینگی وائرل انفیکشن کی تشخیص میں مدد کے لیے سیرم یا پلازما میں اینٹی باڈیز (IgG اور IgM) اور ڈینگی وائرس NS1 اینٹیجن سے ڈینگی وائرس کی کوالیٹیٹو پتہ لگانے کے لیے ایک تیز کرومیٹوگرافک امیونواسے ہے۔

[خلاصہ]

ڈینگی بخار ایک شدید ویکٹر سے پیدا ہونے والی متعدی بیماری ہے جو مچھروں کے ذریعے پھیلنے والے ڈینگی وائرس سے ہوتی ہے۔ڈینگی وائرس کا انفیکشن ریکسیو انفیکشن، ڈینگی بخار، ڈینگی ہیمرجک بخار، ڈینگی ہیمرجک بخار کا باعث بن سکتا ہے۔ڈینگی بخار کی مخصوص طبی علامات میں اچانک شروع ہونا، تیز بخار، سر درد، پٹھوں میں شدید درد، ہڈیوں اور جوڑوں کا درد، جلد پر خارش، خون بہنے کا رجحان، لمف نوڈ کا بڑھ جانا، خون کے سفید خلیوں کی تعداد میں کمی، تھروموبائیٹوپینیا وغیرہ شامل ہیں۔یہ بیماری بنیادی طور پر اشنکٹبندیی اور ذیلی اشنکٹبندیی علاقوں میں مقبول ہے، کیونکہ یہ بیماری ایڈز مچھر سے پھیلتی ہے، اس وجہ سے مقبولیت کچھ موسمی ہوتی ہے، ہر سال عام طور پر مئی ~ نومبر میں ہوتی ہے، چوٹی جولائی ~ ستمبر میں ہوتی ہے۔نئے وبا کے علاقے میں، آبادی عام طور پر حساس ہے، لیکن واقعات بنیادی طور پر بالغ ہیں، مقامی علاقے میں، واقعات بنیادی طور پر بچے ہیں.

اصول

ڈینگی NS1 Ag-IgG/IgM کومبو ٹیسٹ سیرم یا پلازما میں ڈینگی وائرس اینٹی باڈیز (IgG اور IgM) اور ڈینگی وائرس NS1 اینٹیجن کا پتہ لگانے کے لیے ایک کوالٹیٹیو میمبرین سٹرپ پر مبنی امیونوسے ہے۔

IgG/IgM ٹیسٹ کے لیے: ٹیسٹ ڈیوائس پر مشتمل ہوتا ہے: 1) ایک برگنڈی رنگ کا کنجوگیٹ پیڈ جس میں ڈینگی ریکومبیننٹ لفافے اینٹیجنز شامل ہیں جو کولائیڈ گولڈ (ڈینگی کنجوگیٹس) کے ساتھ جڑے ہوئے ہیں، 2) ایک نائٹروسیلوز جھلی کی پٹی جس میں دو ٹیسٹ لائنیں (T1 اور T2 لائنیں) اور کنٹرول لائن (سی لائن)۔T1 لائن کو IgM اینٹی ڈینگی کا پتہ لگانے کے لئے اینٹی باڈی کے ساتھ پہلے سے لیپت کیا جاتا ہے، T2 لائن کو آئی جی جی اینٹی ڈینگی کا پتہ لگانے کے لئے اینٹی باڈی کے ساتھ لیپت کیا جاتا ہے۔جب ٹیسٹ کیسٹ کے نمونے کے کنویں میں ٹیسٹ کے نمونے کی مناسب مقدار بھیجی جاتی ہے، تو نمونہ پورے کیسٹ میں کیپلیری عمل کے ذریعے منتقل ہو جاتا ہے۔آئی جی جی اینٹی ڈینگی، اگر نمونے میں موجود ہو، تو ڈینگی کنجوگیٹس کو باندھ دے گا۔اس کے بعد امیونو کمپلیکس کو T2 بینڈ پر پہلے سے لیپت شدہ ریجنٹ کے ذریعے پکڑا جاتا ہے، جس سے ایک برگنڈی رنگ کی T2 لائن بنتی ہے، جو ڈینگی IgG مثبت ٹیسٹ کے نتیجے کی نشاندہی کرتی ہے اور حالیہ یا دوبارہ ہونے والے انفیکشن کی تجویز کرتی ہے۔آئی جی ایم اینٹی ڈینگی اگر نمونے میں موجود ہو تو ڈینگی کنجوگیٹس سے منسلک ہو جائے گا۔اس کے بعد امیونو کمپلیکس کو T1 لائن پر لیپت ری ایجنٹ کے ذریعے پکڑا جاتا ہے، جس سے ایک برگنڈی رنگ کی T1 لائن بنتی ہے، جو ڈینگی IgM مثبت ٹیسٹ کے نتیجے کی نشاندہی کرتی ہے اور ایک تازہ انفیکشن کی تجویز کرتی ہے۔کسی بھی T لائنوں (T1 اور T2) کی عدم موجودگی منفی نتیجہ بتاتی ہے۔

NS1 ٹیسٹ کے لیے: اس ٹیسٹ کے طریقہ کار میں، اینٹی ڈینگی NS1 اینٹی باڈی کو کیسٹ کے ٹیسٹ لائن والے علاقے میں متحرک کیا جاتا ہے۔پورے خون/سیرم/پلازما کے نمونے کو نمونے میں اچھی طرح سے رکھنے کے بعد، یہ اینٹی ڈینگی NS1 اینٹی باڈی لیپت ذرات کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتا ہے جو نمونے کے پیڈ پر لگائے گئے ہیں۔یہ مرکب کرومیٹوگرافی کے ساتھ ٹیسٹ کی پٹی کی لمبائی کے ساتھ منتقل ہوتا ہے اور غیر متحرک اینٹی ڈینگی NS1 اینٹی باڈی کے ساتھ تعامل کرتا ہے۔اگر نمونے میں ڈینگی وائرس NS1 اینٹیجن ہے تو، ٹیسٹ لائن کے علاقے میں ایک رنگین لکیر نمودار ہوگی جو مثبت نتیجہ کی نشاندہی کرتی ہے۔اگر نمونے میں ڈینگی وائرس NS1 اینٹیجن نہیں ہے، تو اس خطے میں رنگین لکیر نظر نہیں آئے گی جو منفی نتیجہ کی نشاندہی کرتی ہے۔

ایک پروسیجرل کنٹرول کے طور پر کام کرنے کے لیے، کنٹرول لائن کے علاقے میں ہمیشہ ایک رنگین لکیر نمودار ہوتی ہے جو اس بات کی نشاندہی کرتی ہے کہ نمونہ کا مناسب حجم شامل کر دیا گیا ہے اور جھلی کی چوٹ آئی ہے۔

اسٹوریج اور استحکام

کمرے کے درجہ حرارت یا ریفریجریٹڈ (4-30℃ یا 40-86℉) پر مہر بند پاؤچ میں پیک کیا ہوا اسٹور کریں۔ٹیسٹ ڈیوائس مہر بند پاؤچ پر چھپی ہوئی میعاد ختم ہونے کی تاریخ کے ذریعے مستحکم ہے۔

ٹیسٹ کو استعمال ہونے تک سیل بند پاؤچ میں ہی رہنا چاہیے۔

نمونہ جمع کرنا اور تیاری

1. ڈینگی NS1 Ag-IgG/IgM کومبو ٹیسٹ سیرم یا پلازما پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔

2. باقاعدہ طبی لیبارٹری کے طریقہ کار کے بعد پورے خون، سیرم یا پلازما کے نمونے جمع کرنا۔

3. نمونہ جمع کرنے کے فوراً بعد جانچ کی جانی چاہیے۔نمونوں کو کمرے کے درجہ حرارت پر طویل عرصے تک نہ چھوڑیں۔طویل مدتی سٹوریج کے لیے، نمونوں کو -20℃ سے نیچے رکھا جانا چاہیے۔

4. جانچ سے پہلے نمونوں کو کمرے کے درجہ حرارت پر لائیں۔منجمد نمونوں کو جانچنے سے پہلے مکمل طور پر پگھلا اور اچھی طرح ملا دینا چاہیے۔نمونوں کو بار بار منجمد اور پگھلانا نہیں چاہئے۔

ٹیسٹ کا طریقہ کار

جانچ سے پہلے ٹیسٹ، نمونہ، بفر اور/یا کنٹرول کو کمرے کے درجہ حرارت 15-30℃ (59-86℉) تک پہنچنے دیں۔

1. تیلی کو کھولنے سے پہلے کمرے کے درجہ حرارت پر لائیں۔مہر بند تیلی سے ٹیسٹ ڈیوائس کو ہٹا دیں اور اسے جلد از جلد استعمال کریں۔ٹیسٹ ڈیوائس کو صاف اور سطحی سطح پر رکھیں۔

2. IgG/IgM ٹیسٹ کے لیے: ڈراپر کو عمودی طور پر پکڑیں ​​اور نمونہ کا 1 قطرہ (تقریباً 10μl) ٹیسٹ ڈیوائس کے نمونہ کنویں (S) میں منتقل کریں، پھر بفر کے 2 قطرے (تقریباً 70μl) شامل کریں اور ٹائمر شروع کریں۔ذیل کی مثال دیکھیں۔

3. NS1 ٹیسٹ کے لیے: ڈراپر کو عمودی طور پر پکڑیں ​​اور سیرم یا پلازما کے 8~10 قطرے (تقریباً 100μl) ٹیسٹ ڈیوائس کے نمونہ کنویں میں منتقل کریں، پھر ٹائمر شروع کریں۔ذیل کی مثال دیکھیں۔

4. رنگین لکیروں کے ظاہر ہونے کا انتظار کریں۔15 منٹ پر نتائج پڑھیں۔20 منٹ کے بعد نتیجہ کی تشریح نہ کریں۔

نتائج کی تشریح

مثبت:

IgG/IgM ٹیسٹ کے لیے: جھلی پر کنٹرول لائن اور کم از کم ایک ٹیسٹ لائن ظاہر ہوتی ہے۔T2 ٹیسٹ لائن کی ظاہری شکل ڈینگی مخصوص IgG اینٹی باڈیز کی موجودگی کی نشاندہی کرتی ہے۔T1 ٹیسٹ لائن کی ظاہری شکل ڈینگی مخصوص IgM اینٹی باڈیز کی موجودگی کی نشاندہی کرتی ہے۔اور اگر T1 اور T2 دونوں لائنیں نظر آتی ہیں، تو یہ ڈینگی کے مخصوص IgG اور IgM اینٹی باڈیز دونوں کی موجودگی کی نشاندہی کرتا ہے۔اینٹی باڈی کا ارتکاز جتنا کم ہوگا، نتیجہ کی لکیر اتنی ہی کمزور ہوگی۔

NS1 ٹیسٹ کے لیے: دو لائنیں ظاہر ہوتی ہیں۔ایک لائن ہمیشہ کنٹرول لائن کے علاقے (C) میں ظاہر ہونی چاہیے، اور دوسری ایک ظاہری رنگ کی لائن ٹیسٹ لائن کے علاقے میں ظاہر ہونی چاہیے۔

منفی:

کنٹرول ریجن (C) میں ایک رنگ کی لکیر ظاہر ہوتی ہے۔ ٹیسٹ لائن کے علاقے میں کوئی ظاہری رنگ کی لکیر نظر نہیں آتی۔

غلط: کنٹرول لائن ظاہر ہونے میں ناکام۔ناکافی نمونہ حجم یا غلط طریقہ کار کی تکنیک کنٹرول لائن کی ناکامی کی سب سے زیادہ ممکنہ وجوہات ہیں۔طریقہ کار کا جائزہ لیں اور ٹیسٹ کو نئے ٹیسٹ ڈیوائس کے ساتھ دہرائیں۔اگر مسئلہ برقرار رہتا ہے، تو فوری طور پر ٹیسٹ کٹ کا استعمال بند کر دیں اور اپنے مقامی ڈسٹری بیوٹر سے رابطہ کریں۔